題:
R包用於匯總CRISPR篩選的數據分析
natasa
2017-06-05 21:36:55 UTC
view on stackexchange narkive permalink

我們正在設計CRISPR / Cas9實驗並考慮下游數據分析。

是否有任何R軟件包可以使用CRIPSR / Cas9來分析來自合併遺傳篩選的原始NGS讀取計數數據,從而破壞細胞群中的基因表達?我想我們需要從基礎知識入手,即序列處理,數據探索,可視化等。

這與其他表達分析有何不同?即為什麼不能使用一種標準的工作流程進行差異表達分析?
我只想強調一下,使用CRISPR / Cas9進行編輯並僅估算表達本身並不是一個好主意。如果您確實有很多樣本,那麼您可能首先有興趣檢查此編輯帶來的突變負擔。然後最好進行表達分析。我也將使用下面提到的以下工具,但是即使不考慮我的編輯是否拋出大量SNV,也不會做任何事情。如果沒有拋出,則可以進行線性混合效果的下游分析。
二 答案:
sssascha
2017-06-06 14:05:08 UTC
view on stackexchange narkive permalink

假設您的意思是針對許多基因座的CRISPR篩查(例如使用GeCKO庫),則在此處

它使用線性混合效應模型比較指南在選擇步驟之前和之後進行計數,從而允許多個指南/基因和多個重複。它也可以進行初始讀取對齊AFAIK,如果您有任何疑問,作者應該反應靈敏。

另一個選擇可以是 python 程序 MAGeCK

plat
2017-06-07 13:28:15 UTC
view on stackexchange narkive permalink

根據我的經驗,在R中幾乎沒有關於CRISPR匯集篩選的內容。其中之一是 ScreenBEAM。它使用線性混合模型,通過在分析的同一步驟中同時考慮所有指南來確定基因水平的重要性。但是,它對我來說不是很好。

在R之外還有其他易於使用的分析方法,例如建議的MAGeCK或HiTSelect,BAGEL或 CRISPR-Analyzer

CRISPR-Analyzer是一個在線工具,可能有用,並且可以在一次分析中概括一些上述方法。但是,如果您想從命令行工作,我建議您使用BAGEL進行基因必要性實驗,並建議您使用MAGeCK進行其他實驗設置(即對照與治療)

抱歉,由於沒有放置所有鏈接,我只能此刻放兩個!



該問答將自動從英語翻譯而來。原始內容可在stackexchange上找到,我們感謝它分發的cc by-sa 3.0許可。
Loading...